Генетическая экспертиза по установлению близкого родства

Генетическая экспертиза по установлению близкого родства — это вид молекулярно-генетического исследования, направленный на выявление и сопоставление наследуемых признаков ДНК, общих для предполагаемых родственников.

Генетическая экспертиза по установлению близкого родства может потребоваться:

• при необходимости установить отцовство/материнство, если невозможно получить образцы ДНК у предполагаемых родителей;
• для подтверждения родства с целью получения наследства либо отказа от него;
• для подтверждения родства в целях иммиграции (при наличии родственных связей).

Чаще всего у предполагаемых родственников берутся:

• буккальный эпителий (соскоб ватной палочкой с внутренней стороны щеки);
• кровь из пальца (обычно 0,3–0,5 мл);
• сухие пятна крови на ватных дисках/марле;
• волосы с фолликулами («луковицами»);
• ногти;
• слюна (при необходимости — иные биологические объекты).

Если по объективным причинам перечисленные материалы получить невозможно, используют другие объекты биологического происхождения.

Взятие образцов тканей для установления родства по требованию суда осуществляется в присутствии свидетелей в соответствии со следующими нормативными актами:

• ст. 35 Федерального закона от 31 мая 2001 г. № 73-ФЗ «О государственной судебно-экспертной деятельности в Российской Федерации»;
• п. 84.4 документа «Порядок организации и производства судебно-медицинских экспертиз в государственных судебно-экспертных учреждениях Российской Федерации» (Приказ Минздравсоцразвития РФ № 346н от 12.05.2010 г.).

Взятие образцов для установления близкого родства в частном порядке (не для суда) проводится либо самостоятельно заказчиками (при соблюдении инструкции), либо в лаборатории «Национального научно-исследовательского института».

Исследование обычно включает три этапа:

Выделение ДНК из биологического материала.

Это ключевой этап, поэтому часто используются коммерческие наборы реактивов ведущих зарубежных производителей, например Applied Biosystems (США), Promega (США), QIAGEN (Германия).

Амплификация участков ДНК методом полимеразной цепной реакции (ПЦР)

— увеличение количества исследуемых локусов для последующего анализа.

Анализ генетических маркеров:

• определение коротких тандемных повторов (STR) методом капиллярного электрофореза; и/или
• выявление однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) методом секвенирования.

Точность экспертизы зависит от степени родства, количества участников исследования и числа анализируемых маркеров. Для повышения достоверности рекомендуется включать в исследование более двух лиц, предположительно находящихся в родстве.

Например, при экспертизе «внук — бабушка» вероятность положительного заключения может составлять более 90%, а вероятность отрицательного — около 85%. При исследовании «внук — бабушка — дедушка» вероятность положительного заключения возрастает до 99%, а вероятность отрицательного — до 100%.

В ходе экспертизы по установлению близкого родства могут анализироваться:

Аутосомные локусы.

Аутосомы — парные хромосомы, одинаковые у мужчин и женщин (все, кроме половых X и Y). Маркеры на аутосомах наиболее часто используются при установлении родства.

STR-локусы Y-хромосомы.

Y-хромосома определяет мужской пол и передаётся от отца к сыну в практически неизменном виде. База Y-chromosome Haplotype Reference Database рекомендует использовать 22 полиморфных локуса. Дополнительно теме посвящена статья «Генетическая экспертиза Y-хромосомы (тест семейной принадлежности)».

STR-локусы X-хромосомы.

У женщин две X-хромосомы, у мужчин — одна. В мужских клетках X-хромосома передаётся детям практически без рекомбинации. Компания QIAGEN выпускает набор Investigator Argus X-12 Kit для картирования локусов, расположенных на X-хромосоме.

Нуклеотидный профиль митохондриальной ДНК (мтДНК).

Анализ мтДНК используется для установления родства по материнской линии. Теме посвящена статья «Генетическая экспертиза митохондриальной ДНК (мтДНК)».

В ходе экспертизы анализируются те участки ДНК, которые могли быть унаследованы от предполагаемого родственника по мужской или женской линии.

Родство по отцовской линии

устанавливают с использованием аутосомных локусов и/или локусов Y-хромосомы. Типирование Y- и X-хромосом применяют, в частности, при следующих вариантах:

• по Y-хромосоме: «дед по отцу — внук», «дядя по отцу — племянник», «братья по отцу»;
• по X-хромосоме: «бабушка по отцу — внучка», «тётя по отцу — племянница», «сестра по отцу».

Родство по материнской линии

устанавливают с использованием аутосомных локусов и/или анализа митохондриальной ДНК.

Для проведения исследования необходимы образцы биологического материала предполагаемой бабушки и/или предполагаемого дедушки, матери, а также ребёнка (сына/дочери).

Цель: установить родство дедушки/бабушки по отцовской линии в отношении ребёнка (сына/дочери).

Система генетических маркеров: аутосомные маркеры, локусы Y- и X-хромосом.

Пример интерпретации по одному маркеру

Генотип сына (дочери) по одному маркеру — DW, генотип матери — SW, предполагаемой бабушки — PR, предполагаемого дедушки — DA. Известно, что ребёнок является родным ребёнком матери. Следовательно, аллель W, присутствующий и у матери, и у ребёнка, получен ребёнком от матери. Аллель D получен ребёнком от биологического отца и, соответственно, должен присутствовать в генотипе одного из родителей отца (то есть у бабушки и/или дедушки по отцовской линии).

В генотипе предполагаемого дедушки выявлен аллель D, что поддерживает гипотезу биологического родства между дедушкой и ребёнком (рисунок 1).

Для проведения исследования необходимы образцы биологического материала предполагаемой бабушки и/или предполагаемого дедушки, а также ребёнка (сына/дочери).

Цель: установить родство дедушки/бабушки по материнской линии в отношении ребёнка (сына/дочери).

Система генетических маркеров: аутосомные маркеры, нуклеотидный профиль митохондриальной ДНК (мтДНК).

Пример интерпретации по одному маркеру

Генотип сына (дочери) по одному маркеру — DW, генотип отца — SW, предполагаемой бабушки — PR, предполагаемого дедушки — DA. Известно, что ребёнок является родным ребёнком своего отца. Следовательно, аллель W, присутствующий и у отца, и у ребёнка, получен ребёнком от отца. Аллель D получен ребёнком от биологической матери и, соответственно, должен присутствовать в генотипе одного из родителей матери (то есть у бабушки и/или дедушки по материнской линии).

В генотипе предполагаемого дедушки выявлен аллель D, что поддерживает гипотезу биологического родства между дедушкой по материнской линии и ребёнком (рисунок 2).

Для проведения исследования необходимы образцы биологического материала предполагаемой тёти/предполагаемого дяди, матери, отца, а также племянника/племянницы.

Цель: установить родство тёти/дяди по материнской линии в отношении племянника/племянницы.

Система генетических маркеров: аутосомные маркеры, нуклеотидный профиль митохондриальной ДНК (мтДНК).

Пример интерпретации по одному маркеру

Генотип ребёнка (сына/дочери) по одному маркеру — DW, генотип предполагаемой тёти — PA, генотип предполагаемого дяди — PD, генотип биологической матери — DR, генотип биологического отца — SW. Известно, что ребёнок является родным ребёнком своих родителей. Следовательно, аллель W, присутствующий и у отца, и у ребёнка, получен ребёнком от отца, а аллель D — от матери.

В свою очередь, аллель D должен присутствовать в генотипе одного из родителей матери (бабушки или дедушки) и может встречаться у её родных братьев и сестёр (то есть у предполагаемой тёти и/или предполагаемого дяди). На рисунке 3 аллель D выявлен в генотипе предполагаемого дяди, что поддерживает гипотезу биологического родства между дядей по материнской линии и племянником/племянницей. Анализ совокупности большого числа локусов позволяет с высокой надёжностью установить, является ли предполагаемая тётя или предполагаемый дядя биологическим родственником ребёнка.

Дополнительный метод по материнской линии: мтДНК

Более информативным методом подтверждения родства по материнской линии является определение нуклеотидного профиля митохондриальной ДНК. У родственников, происходящих от одной материнской линии, профиль мтДНК будет одинаковым (на рисунке 3 это обозначено зелёным кругом).

Для проведения исследования необходимы образцы биологического материала предполагаемой тёти/предполагаемого дяди, матери, отца, а также племянника/племянницы.

Цель: установить родство тёти/дяди по отцовской линии в отношении племянника/племянницы.

Система генетических маркеров: аутосомные маркеры, локусы Y- и X-хромосом.

Y-хромосома присутствует только у мужчин и передаётся по мужской линии: от отца — сыну. Поэтому при исследовании маркеров, расположенных на Y-хромосоме, сравнивают профили в образцах предполагаемого дяди и племянника и оценивают степень их соответствия (рисунок 4).

Согласно Постановлению Пленума Верховного Суда Российской Федерации от 21 декабря 2010 г. № 28 «О судебной экспертизе по уголовным делам», экспертиза по уголовному делу может быть проведена либо государственным экспертным учреждением, либо некоммерческой организацией, созданной в соответствии с Гражданским кодексом Российской Федерации и Федеральным законом «О некоммерческих организациях» и осуществляющей судебно-экспертную деятельность в соответствии со своим уставом.

Коммерческие организации и лаборатории, индивидуальные предприниматели и образовательные учреждения не имеют права проводить экспертизу по уголовному делу, равно как и некоммерческие организации, для которых экспертная деятельность не является уставной. Экспертиза, подготовленная указанными организациями в рамках уголовного процесса, может быть признана недопустимым доказательством, то есть доказательством, полученным с нарушением требований процессуального закона.

Недопустимые доказательства не могут использоваться в процессе доказывания, в том числе исследоваться или оглашаться в судебном заседании, и подлежат исключению из материалов уголовного дела.

Так как «Национальный научно-исследовательский институт» является автономной некоммерческой организацией, а проведение судебных экспертиз относится к его основной уставной деятельности, он вправе проводить экспертизы, в том числе по уголовным делам.